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发布时间:2024-07-27
浓缩胶和分离胶分别发挥的作用
浓缩胶的作用如下:
1、减小离子在移动时的阻力。浓缩胶浓度低,孔径大,因此浓缩胶可以减小离子在移动时的阻力。
2、可以堆积在一起。浓缩胶具有堆积作用,可以把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带中。
3、提高电泳的准确度。浓缩胶可以形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层,大大提高了电泳的灵敏度。
分离胶的作用如下:
1、提高原子的间距。分离胶为一种水溶性胶粘剂,可以提高原子的距离,从而达到使物质的目的。
2、使蛋白质相互分离。分离胶可以使蛋白质样品按照蛋白质的相对质量的大小分离。
浓缩胶和分离胶分别发挥的作用。
1、浓缩胶的作用:
有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带,在电泳的时候可以看到样品被压成一条线。
2、分离胶的作用:
有分离分子的作用,为电荷效用和分子筛效用。当样品从浓缩胶进入分离胶时,由于蛋白的分子量不一样,其在分离胶中的泳动速度不一样,这样就能够分离目的蛋白,蛋白越大,所对应的分离胶浓度应该越小,比如90k以上的蛋白一般用6%的分离胶来分离。
扩展资料:
分离胶和浓缩胶因为浓度不一样导致孔径不一样,蛋白在其中的泳动速度不一样。
浓缩胶的浓度通常为3.9%,浓度比较小;浓缩胶中的孔隙较大,起到的作用是为了让蛋白质混合物在进入分离胶之前都到达同一起跑线,以便在分离胶中更好的分开,因此一定要充分跑完浓缩胶之后再调电压。
分离胶的浓度从6%-15%不等,当样品从浓缩胶进入分离胶时,由于蛋白的分子量不一样,小分子的物质容易通过, 阻力小,迁移速度快;大分子的则受到较大 的阻力而被滞后。这样就能够分离目的蛋白。
参考资料来源:百度百科-浓缩胶
参考资料来源:百度百科-分离胶
为什么浓缩胶具有浓缩作用啊?实验的思考题~~~求大神解答!!!
浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。大大提高了电泳的灵敏度。
参考答案:http://baike.baidu.com/view/3335221.htm
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中浓缩胶的作用是什么?
在上样孔里加样的时候样品是有一定的高度的,样品里的蛋白没有站在一条起跑线上。浓缩胶的作用就是压缩样品中的蛋白质成为一条细线站在同一条起跑线上,这样影响蛋白迁移速率的因素就只有分子量的大小了,也就更有可比性了。
浓缩胶的作用原理?
浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。大大提高了电泳的灵敏度。
浓缩胶的作用原理?
浓缩胶是在不连续聚丙烯 酰胺凝胶电泳中,同一介质的凝胶浓度分为 两种,负极的加样侧一般浓度为2%〜5%, 称为浓缩胶,其余部分浓度为6%〜8%, 称为分离胶。
由于浓缩胶浓度低、孔径大, 而分离胶浓度高、孔径小。
带电荷的蛋白质 或核酸离子在大孔径胶中移动时阻力小,移动速度快,当接近小孔径的分离胶时,遇到的阻力大,移动速度减慢而使样品浓缩,形 成一条狭窄区带,以减少电泳过程中的谱 带扩散。
浓缩胶与分离胶的pH值不同也呵 以强化样品的浓缩作用。
浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。
当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。
电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。
蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。
电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。
大大提高了电泳的灵敏度。
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